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CTC+ PCR
CTC分離和富集
結果分析
細胞裂解，提取核酸（DNA或者mRNA)
qPCR，ddPCR
根據PCR儀配套軟件，進行分析
核酸試劑盒提取流出液中的核酸分子
設計引物，進行擴增
循環腫瘤細胞分選儀
案例應用：
臨床試驗：
目的： 通過檢測黑色素瘤患者的CTC mRNA生物標志物，可否用于轉移黑色素瘤患者進行免疫檢查點抑制劑療效評估。
入組患者：56例黑色素瘤 III/IV期，計劃接受免疫治療（ipilimumab，nivolumab，pembrolizumab）的患者。
檢測分子： CTC的 mRNA 生物標志物——MART1，TRP2，MAGEA3，PAX和GALNCT。
試驗方案：
1.治療前，分離CTC，進行mRNA生物標志物檢測（cutoff≥ 2 mRNA分子）；
2.免疫治療后，定期采血，進行CTC mRNA生物標志物檢測，通過PFS， OS等評估CTC mRNA生物標志物與療效的關系。同時，分離IV期患者的CTC進行成球培養和RNA測序。
結論：臨床試驗進行中，數據待發表。
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